具有3 x 7孔的可灌注通道μ-Slide，用于長期球體培養和高端顯微鏡觀察

非常適合在Bioinert表面上長期培養和灌注3D球體或類器官

靈活的灌注準備：球體可以直接在孔中轉移或產生

出色的光學質量成像室，用于高分辨率顯微鏡成像

應用領域：
●三維細胞聚集體（例如球體和類器官）的培養和高分辨率顯微鏡
●與ibidi Pump System或任何其他帶Luer連接器的泵設備一起使用
●在長期培養過程中灌注球體以提供新鮮的培養基，并獲得球體的生長動力學
●直接在孔中產生球體
●球體研究以用于下游處理（例如，免疫熒光，組織學和生化測定）
●細胞單層（貼壁細胞），懸浮細胞或共培養的灌注
●具有上下游代謝功能的單片器官設置
●活細胞成像和3D細胞聚集的顯微鏡檢查
●活細胞和固定細胞以及細胞聚集的免疫熒光染色和高分辨率熒光顯微鏡

技術特征：
●優化的球體/類器官培養和顯微鏡成像孔設計
●一張載玻片最多可分析21個樣品
●灌注可用于3D細胞聚集體培養過程中的最佳營養供應
●開放式孔格式可輕松進行樣品制備-用蓋玻片輕松封閉孔以適用于流體培養
●通道創建孔的簡單流體連接
●魯爾接頭使泵連接變得容易（例如，與ibidi泵系統連接）
●提供三種表面：
●生物惰性的表面完全鈍化，無細胞粘附
●無涂層，可最大程度地減少細胞粘附和懸浮細胞
●ibiTreat（經組織培養處理）可實現最佳細胞粘附
●可以通過ibidi Polymer Coverslip底部使用高分辨率熒光顯微鏡觀察樣品
●與染色和固色液兼容
●與DIC蓋一起使用時兼容微分干涉對比（DIC）顯微鏡
●由完全生物相容的材料制成
 

μ-Slide球體灌注培養原理：

μ-Slide球體灌注是用于培養自由漂浮的3D聚集體的專用流動室。它由3 x 7平底孔組成，這些孔通過上方的通道連接。每個孔形成自己的壁，在此培養標本。

通過通道進行灌注時，新鮮培養基會持續擴散到樣本中。這樣可確保在整個實驗過程中獲得最佳的營養和氧氣擴散，而樣品不會受到明顯的剪切力。

該設置可確保實現最大的生存能力，但對球體，類器官或組織的剪切應力最小。
 

此處顯示的是μ-Slide橢球體灌注的單孔中的計算流體動力學（CFD）模擬。 針對底部壁fluid中的標本優化了每個孔的流體特性。請注意，剪切力在上部孔區占主導地位，而生態位受到保護。

μ-Slide球體灌注載玻片是一個薄的ibidi聚合物蓋玻片底部，該底蓋具有最高的光學質量（與玻璃相比），非常適合高分辨率顯微鏡檢查。與油浸顯微鏡和熒光成像的兼容，使μ-Slide球體灌注成為理想的球體成像室。
 

實驗工作流程

μ-Slide球體灌注是一項革命性的技術，可為球體，類器官或組織創造理想的條件。它還允許它們同時培養和成像。

優點：
●最佳營養和氣體擴散
●減少細胞凋亡和壞死
●增大球體尺寸和壽命
●長期培養具有出色的生存力和增殖能力
●成熟度提高

播種預成型的球體

通過簡單的工作流程，可以使用移液器輕松地將現有3D細胞聚集體放入孔中。關閉孔后，用培養基填充通道，并使用ibidi Pump System或任何其他細胞培養泵開始灌注。可以使用所有常用步驟和方法（例如，懸滴，液體覆蓋，ULA平板或生物反應器）生成球體。μ-Slide球體灌注本身不需要任何嵌入的基底，支架或支撐結構。
 

孔內球體的形成

或者，可以在帶有Bioinert表面的μ-Slide球狀體灌注孔內直接生成球狀體。這種自組織過程是一種簡單且省時的方法，可在每個單孔中生成均質的球體。
 

三維細胞聚集體可以很容易地回收用于下游應用，例如組織學，蛋白質譜分析和進一步培養。

μ-Slide球體灌注的應用

μ-Slide球體灌注是一種易于使用的微流生物反應器，適用于多細胞3D聚集體的多種應用。可選擇地，單個細胞在附著到孔底時可用作懸浮培養物或用作細胞單層。此外，可以將多種細胞類型組合在一個孔中，以創建長期的共培養系統。μ-Slide球體灌注的革命性技術提供了一種高效且可重現的方法，可以同時對標本進行生長和成像。
 

應用實例

灌注培養時高度改善的球狀體生長速率
 

L929成纖維細胞在μ-Slide球狀體灌注中顯示出球狀體，Bioinert，第1至14天，接種濃度為5 x 10 5單細胞/ ml。左：無灌注，第二天換培養基。右：使用ibidi泵系統灌注，0.75毫升/分鐘。相差顯微鏡，10倍物鏡，孔直徑800 μm。

貼壁細胞熒光成像
 

接種后2小時固定在μ-Slide球形灌注液ibiTreat中的L929成纖維細胞的熒光成像。綠色：F-肌動蛋白（phalloidin）；藍色：核（DAPI）。寬視野熒光顯微鏡，10倍物鏡。