貨號:69506 血液/組織基因組DNA提取試劑盒 (250)
英文名稱:DNeasy Blood & Tissue Kit (250)
中文名稱:血液/組織基因組DNA提取試劑盒 (250)
品 牌:Qiagen
貨 號:69506
從動物血液和組織、細胞、酵母、細菌或者病毒中純化總DNA
為各種類型樣本提供標準化的純化方法
即使是特殊類型起始樣本也可以獲得高產量DNA
高品質DNA
經過優化的操作方法適合處理多種起始樣本
可選擇離心柱方式或96孔板高通量方式
DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅膠膜技術的離心柱或96孔板方式快速方便的純化DNA。大多數樣本可直接用蛋白酶K消化處理,無需機械破碎,減少了手動操作時間。為特殊樣本提供優化的純化方法,獲得高重復性、高純度的DNA,用于生物研究、基因型分析和獸醫病理研究。DNA純化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit,在QIAcube全自動核酸純化儀上自動化進行。
特點
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參數
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應用
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PCR, real-time PCR, genotyping
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洗脫體積
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100–200 μl
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規格
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96-well plate, spin column
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主要樣本類型
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Blood, tissue
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處理
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Manual
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純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白
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DNA
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樣本量
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100 μl/25 mg
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技術
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Silica technology
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每次運行或制備時間
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20 minutes – 1 hour
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產量
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6 μg/30 μg
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性能
高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能夠從動物血液和組織樣本中純化大量的總DNA(參見下表和DNA yields)。優化的實驗方案可確保非標準樣本的高產量,如動物毛發(參見Genotyping of horses)和培養細胞、固定的組織,或者革蘭氏陽性和陰性細菌。獨特的在線實驗方案參考文庫,可從酵母、昆蟲、毛發和其他類型樣本中純化DNA。
使用DNeasy Blood & Tissue Kits從動物組織中純化的DNA產量樣本來源
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樣本量
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DNA(μg)
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哺乳動物血液
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100 μl
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3–6
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鳥類血液
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5 μl
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9–40
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HeLa細胞
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2 x 106
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15–25
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肝臟
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25 mg
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10–30
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腦
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25 mg
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15–30
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腎臟
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25 mg
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15–30
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脾臟
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10 mg
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5–30
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小鼠尾
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1.2 cm(尾部)
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10–25
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大鼠尾
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0.6 cm(尾部)
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20–40
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豬耳
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25 mg
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10–30
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馬毛
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10根毛發
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2–4
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魚鰭
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20 mg
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10–20
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魚卵(鯖魚)
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10 mg
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5–10
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DNeasy Blood & Tissue Kits簡化了從多種樣本類型中純化DNA的流程,包括在生命科學、獸醫學和基因分型研究應用中常見的動物種類(參見High-quality DNA)。純化得到的DNA不含PCR抑制劑,能在標準多重(參見Efficient 16plex PCR)real-time PCR(參見Real-time PCR)中進行靈敏的檢測。DNeasy Blood & Tissue Kits確保了可靠的實驗結果,從轉基因小鼠的實驗室分析(參見High-throughput purification)到家畜的育種項目(參見Genotyping of pigs)和種系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地擴大常規的檢測應用的規模。
原理
DNeasy Blood & Tissue Kit適用于從不同的樣本中,包括新鮮或冷凍的動物組織和細胞、血液或者細菌,快速純化總DNA(如,基因組、線粒體和病原體等)。
DNeasy膜整合了硅膠膜的結合特性,經簡單顯微離心技術或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System處理即可。在高濃度離液鹽的環境中,DNA吸附在DNeasy膜上,可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中設計的緩沖液條件,旨在使DNA特異性吸附到硅膠膜上,并且優化去除污染物和酶抑制劑。
純化過程不需要苯酚或氯仿抽提或乙醇沉淀,僅涉及少量手工步驟。這使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常適合同時處理多個樣本。對于高通量的應用,DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能夠同時處理96或192個樣本。
操作流程
可靠的硅膠膜技術,利用便捷的離心柱或96孔板形式,確保了快速可重復的DNA純化,不再需要有機抽提和乙醇沉淀(參見DNeasy Mini and 96 procedures)。樣本首先用蛋白酶K裂解。調整緩沖條件,以提供最佳的DNA結合條件并將裂解物上樣到DNeasy Mini離心柱或DNeasy 96孔板上。在離心過程中,DNA選擇性地結合到DNeasy膜上,污染物通過。余下的污染物和酶抑制劑將在兩個高效的洗滌步驟中被去除。然后,用水或緩沖液將DNA洗脫,待用。
DNeasy Mini離心柱預裝在收集管中,并且單獨封存,確保方便和安全。使用DNeasy Mini離心柱的純化過程可在QIAcube全自動核酸純化儀上自動進行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式進行高通量處理。
應用
DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品質DNA,可直接用于多種下游分析,包括:
生命科學研究
家畜育種
種系基因分型研究
獸醫病理分析研究
常規的應用檢測